Efeito da irradiação na microbiota fúngica de plantas medicinais / Irradiation effect on mycoflora of medicinal plants

O aumento do consumo de produtos de origem natural tem ocasionado problemas de saúde pública devido ao risco da contaminação fúngica e a possível presença de micotoxinas. Objetivou-se, neste estudo, identificar as espécies fúngicas com potencial micotoxigênico e avaliar o efeito da irradiação gama (60Co) na destruição da microbiota fúngica natural de cinco plantas medicinais: Alcachofra (Cynara scolymus L.), Boldo (Peumusboldus Molina), Camomila (Matricaria recutita L.), Chapéu de couro (Echinodorusgrandiflorus Micheli) e Sene (Cassia acutifolia Delile). A quantificação de fungos filamentosos e leveduras foi efetuada pela Técnica de Diluição Seriada em meio DRBC. Em Camomila foram identificados 8 isolados de Aspergillus flavus, sendo 2 (25 por cento) produtores de aflatoxina B1 e B2 e 5 isolados de Aspergillus ochraceus, sendo 2 (40 por cento) produtores de ocratoxina A. Em Alcachofra foi identificado 1 isolado de Aspergillus ostianus produtor de ocratoxina A. Observou-se redução total da contagem de fungos em Boldo a partir de 3 kGy e em Chapéu de couro e Sene a partir de 5 kGy. Em Alcachofra, a contagem inicial de 5,0 x 10(6) UFC/g foi reduzida para 3,5 x 10² UFC com dose de 10 kGy. Nessa mesma dose a contagem fúngica em Camomila foi reduzida de 3,0 x 10(5) UFC/g para 2,2 x 10³ UFC/g.

The increasing consumption of natural products has brought about problems related to public health due to the risk of fungi contamination and the considerable possibility of mycotoxin presence. The aim of this work was to identify the fungi species with mycotoxigenic potential and to evaluate the effect of gamma irradiation (60Co) on killing the natural fungi microbiota of five medicinal plants: artichoke (Cynara scolymus L.), boldo (Peumusboldus Molina), chamomile (Matricaria recutita L.), burhead (Echinodorusgrandiflorus Micheli), and senna (Cassia acutifolia Delile). The qualification of filamentous fungi and yeast was carried out utilizing the Technique of Serial Dilutions on DRBC medium. Eight isolates of Aspergillus flavus were identified onchamomile, two (25 percent) beingproducers of aflatoxins B1 and B2 as well as five isolates of Aspergillus ochraceus, two (40 percent) being producers of ocratoxin. On artichoke, one isolate of Aspergillus ostianus was identified as ocratoxin A producer. A reduction on the total counting of fungi was observed in boldo with irradiation higher than 3 kGy, and in both burhead and senna with irradiation higher than 5 kGy. The initial counting on artichoke of 5.0 x 10(6) CFU/g experienced a reduction to 3.5 x 10² with doses of 10 kGy. With this same dose the fungi counting on chamomile was reduced from 3.0 x 10(5) CFU/g to 2.2 x 10³ CFU/g.

Ocratoxina A em café torrado e moído comercializado em Minas Gerais - 2006 / Ochratoxin A in roasted and ground coffee commercialized in Minas Gerais – 2006

Ocratoxina A (OTA) é uma das mais importantes micotoxinas de interesse para a saúde humana. OTA é potencialmente nefrotóxica, teratogênica e imunotóxica, afetando particularmente o sistema renal. É produzida por três espécies principais de fungos: Aspergillus ochraceus, Aspergillus carbonarius e Penicillium verrucosum, com uma menor contribuição para Aspergillus niger. O café é produzido em países tropicais onde condições climáticas são favoráveis ao crescimento de fungos e produção de micotoxinas como OTA. Para avaliar a concentração de OTA em café torrado e moído consumido no estado de Minas Gerais (Brasil), 45 amostras foram coletadas pela Vigilância Sanitária do Estado de Minas Gerais, em 2006. A toxina foi isolada por coluna de imunoafinidade e quantificada por cromatografia líquida de alta eficiência, utilizando detector de fluorescência. (...) Os resultados revelaram que o nível de contaminação de OTA em café não foi significativa.

Occurrence of aflatoxin M1 in parmesan cheese consumed in Minas Gerais, Brazil / Ocorrência de aflatoxina M1 em queijo Parmesão consumido em Minas Gerais, Brasil

Aflatoxina M1 (AFM1) pode ocorrer em leite e produtos de leite, resultante da ingestão de aflatoxina B1 presente em rações de gado leiteiro. Um total de 88 amostras de queijo Parmesão, comercializadas no estado de Minas Gerais, Brasil, no período de marçode 2004 a dezembro de 2004, foram analisadas para aflatoxina M1 por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) com detector de fluorescência, precedida de purificação da amostra por coluna de imunoafinidade. AFM1 foi detectada em 40 das 88 amostras(46,4%). Entretanto, somente duas amostras entre estas estavam contaminadas em um nível acima do limite máximo permitido (250ng kg-1), aceito pela Comunidade Européia para AFM1. O Brasil não apresenta tolerância máxima permitida para AFM1 em queijo.

Aflatoxin M1 (AFM1) may occur in milk and milk products, resulting from the ingestion of aflatoxin B1 in feedstuffs by dairy cow. A total of 88 samples of Parmesan cheese marketed in Minas Gerais state, Brazil, from March 2004 to December 2004, were analyzed for AFM1 by high-performance liquid chromatography (HPLC) with a fluorescence detector following sample clean-up using immunoaffinity columns. AFM1 was detected in 40 of the 88 samples (46.4%). However, only two samples among these were contaminated at a level above the maximum permissible limit (250 ng kg-1) accepted by European Union for AFM1. No AFM1 maximum tolerance limit in cheese has been established in Brazil.

Influência de Saccharomycopsis schoenii e Saccharomycopsis crataegensis na produção de aflatoxinas B1 e G1 por Aspergillus parasiticus em amendoim (Arachis hypogaea L. ) / Saccharomycopsis schoenii and Saccharomycopsis crataegensis effect on B1 and G1 aflatoxins production by Aspergillus parasiticus in peanut (Arachis hypogaea L. )

As aflatoxinas constituem o grupo de metabólitos secundários produzidos principalmente pelos Aspergillus flavus, A. parasiticus e A. nomius. Foi investigado o efeito isolado das leveduras Saccharomycopsis schoenii e S. crataegensis na produção de aflatoxinas B1 e G1 em amendoim, cultivar IAC Caiapó. As amostras de amendoim in natura e previamente autoclavadas foram inoculadas com A. parasiticus (1,6 x106 esporos.mL-1) e cultura das leveduras (1,6 x 108 células.mL-1), seguido de incubação a 25ºC durante sete dias. Foram realizados dois experimentos: no primeiro o fungo filamentoso e as leveduras foram inoculados simultaneamente. No segundo, a levedura foi inoculada 3 h antes da adição de fungo filamentoso. A quantificação das aflatoxinas foi executada por cromatografia em camada delgada. A produção das aflatoxinas B1 e G1 foi reduzida na presença das leveduras. A porcentagem de redução da concentração das aflatoxinas foi maior quando a suspensão do fungo foi adicionada 3 h após a inoculação da suspensão de leveduras. O decréscimo da concentração de aflatoxina B1 atingiu 89,3% e 82,6%, respectivamente na presença de S.schoenii e de S crataegensis. Os níveis de aflatoxina G1 foram reduzidos em 91,2% na presença de S.schoenii e em 93,2% quando S.crataegensis foi inoculada.

Incidência de aflatoxinas, desoxinivalenol e zearalenona em produtos comercializados em cdades do estado de Minas Gerais no período de 1998-2000 / Incidence of aflatoxins, deoxynivalenol and zearalenone in products commercialized in the cities of Minas Gerais state in 1998-2000

A incidência de micotoxinas foi verificada em amostras de amendoim e produtos derivados de amendoim (aflatoxinas), fubá, cereais em flocos e aveia em flocos (zearalenona), farinha de trigo, farelo de trigo e produtos de panificaçäo (desoxinivalenol). As amostras foram coletadas em supermercados de cidades de Minas Gerais, Brasil. O método de cromatografia em camada delgada foi utilizado para quantificar as aflatonoxinas e desoxinivaleno e a cromatografia líquida de alta eficiência para zearalenona. As aflatoxinas foram detectadas em 66 das 120 amostras analisadas. Do total de amostras analisadas, 56 apresentaram níveis de aflatoxina total (B1+B2+G1+G2) acima do limite estabelecido pela Legislaçäo do Ministério da Agricultura e 54 amostras apresentaram níveis de aflatoxina B1+G1 acima do limite estabelecido pela Legislaçäo do Ministério da Saúde. A faixa de contaminaçäo para aflatoxina total encontrada foi de 3 a 2714 ug/kg, com uma contaminaçäo média de 960 ug/kg. Desoxinivalenol (DON) foi detectado em 32 das 47 amostras analisadas, em uma faixa de concentraçäo de 40 a 1205 ug/kg. Sómente uma amostra de aveia em flocos estava contaminada com zearalenona (8,5 ug/kg), dentre as 34 amostras de produtos de cereais analisadas. (AU)

The presence of mycotoxins was verified in samples of peanut and peanut products (aflatoxins),corn meal, cereal flakes and oats flakes (zearalenone), wheat flour, bran and bakery products (deoxynivalenol).The samples were acquired in supermarkets, in the cities of state of Minas Gerais, Brazil. Thin layerchromatography methods were employed to quantify aflatoxins and deoxynivalenol, and a high performanceliquid chromatography method was used for zearalenone. Aflatoxins were detected in 66 of the 120 samplestested. Fifty six samples had total aflatoxins levels ( B1 + B2 + G1 + G2 ) above those established by Brazilianregulations (Ministry of Agriculture) and 54 samples showed aflatoxins levels (B1 + G1 ) above those establishedby Ministry of Health. The concentration of total aflatoxins ranged from 3 to 2714 µg/Kg and the meanconcentration was 960 µg/Kg. Deoxynivalenol (DON ) was detected in 32 out of 47 samples analysed. Theconcentration of DON ranged from 40 to 1205 µg/Kg. Only one sample of oat flakes was found to becontaminated with zearalenone ( 8.5 µg/Kg ) out of 34 samples of cereal products examined. (AU)

Comparaçäo entre Elisa e cromatografia em camada delgada na quantificaçäo de aflatoxinas em amendoim / Comparision between ELISA and thin layer chromatography in the quantification of aflatoxins in peanut

Um método imunoenzimático (ELISA) e a cromatografia em camada delgada (CCD) com comparaçäo visual, foram comparados na determinaçäo de aflatoxinas em amostras de amendoim cru naturalmente contaminado. Para níveis de aflatoxina total até de 50 ug/Kg näo houve diferença significativa (p<0,001) entre os resultados obtidos pelos dois métodos. Para valores de aflatoxinas total superiores a 50 ug/Kg, a técnica de ELISA foi estatisticamente equivalente à cromatografia em camada delgada (p<0,0001) somente quando as amostras foram diluídas para obter níveis de aflatoxinas total até o máximo de 50 ug/Kg. Näo foram observados falsos positivos ou negativos por ELISA quando comparado com cromatografia em camada delgada. (AU)

A method of enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) and a thin layer chroma- tography were compared to determine the aflatoxins in naturally contaminated peanut samples. For val- ues of total aflatoxin concentration until 50 ug/Kg , a significant difference was not observed at the Ievel of p < 0,001 , when compared to the results obtained by the two methods. For values of total aflatoxin concentration higher than 50 ug/Kg , the ELISA Method was onIy statiscally equivalente to thin layer chromatography ( p < 0,001 ) when the samples were diluted at maximum levei of 50 ug/Kg. No false positives and negatives were obtained by ELISA when it was compared with thin layer chromatography. (AU) .

Efeito do ferro na biossíntese de aflatoxina B1 por Aspergillus flavus IMI 190443 após inoculaçäo em dois genótipos de amendoim / Effect of iron on the biosynthesis of aflatoxin B1 by Aspergillus flavus IMI 190443 after inoculation in two peanuts genotypes

Avaliou-se a produçäo de aflatoxina B1 pelo Aspergillus flavus IMI 190443 em sementes de amendoim, genótipos Tatu Vermelho e VRR-245, cultivados no Centro Experimental do Instituto Agronômico de Campinas em 1994/1995 e submetidos a adubaçäo com sulfato ferroso. Após a colheita, os gräos de amendoim foram previamente autoclavados a 121§C por minutos, e inoculados com uma suspensäo de esporos de Aspergillus flavus IMI 190443, em três concentraçöes: 10(3), 10(4), 10(5) esporos/mL. Observou-se uma menor produçäo de aflatoxina B1 no genótipo VRR-245, independente da concentraçäo de esporos de Aspergillus flavus IMI 190443 (10(3), 10(4), e 10(5) esporos/mL) e do tratamento com e sem sulfato ferroso (p<0,05), quando comparado ao Tatu Vermelho. Verificou-se uma menor contaminaçäo com aflatoxina B1 nos genótipos Tatu Vermelho e VRR-245, após adubaçäo e inoculaçäo com Aspergillus flavus IMI 190443, apenas na concentraçäo de 10(3) esporos/mL

Standartization of a method for the inoculation of peanuts (Arachis hypogael L) - Tatu vermelho variety with Aspergillus flavus NRRL 6513, an Aflatoxin B1 producer

Foram determinadas as condiçöes analíticas ideais para a inoculaçäo de uma cepa de Aspergillus flavus NRRL 6513, fortemente produtora de aflatoxina B1 em amendoim, variedade Tatu Vermelho. A maior produçäo de aflatoxina foi verificada após a adiçäo, em 1,0g de amendoim moído e autoclavado (121oC/20 min.), de 0,5 ml de suspensäo salina de esporos (4x10.6) esporos/ml) de Aspergillus flavus NRRL 6513, de 10 dias de idade, seguido de incubaçäo por 7 dias

Efeito do forno de microondas na destruiçäo de aflatoxinas em amendoim / Microwave oven effect on the destruction of aflatoxins on peanuts

Foi verificado o efeito do aquecimento de amostras contaminadas artificialmente com aflatoxinas B1 e G1, pelo forno de microondas, em potência máxima de 0,8kW, por 3 a 6 minutos. A quantificaçäo de aflatoxinas foi desenvolvida por cromatografia em camada delgada por comparaçäo visual com padröes. Os resultados encontrados mostraram uma reduçäo de 41,52 a 69,56(por cento) de aflatoxinas B1 e G1 em amostras torradas por 6 minutos.

Teste preliminar de resistência de dois genótipos de amendoim, 2117 e tatu vermelho, com relaçäo à produçäo de aflatoxina B1 por uma espécie toxigênica de aspergillus flavus link / Preliminary ressistance testing of two peanuts genotypes, 2117 and Tatu Vermelho, in relation to aflatoxin B1 production by a toxigenic strain of aspergillus flavus

Um teste inicial de resitência à contaminaçäo com aflatoxina B1 foi realizado em dois genótipos de amendoim, Tatu Vermelho, o mais plantado no Brasil, e 2117, originário da +ndia. Ambos os genótipos foram cultivados no Instituto Agronômico de Campinas (1995/1996). Após colheita e autoclavagem foram inoculados com Aspergillus flavus IMI 190443, forte produtor de aflatoxina B1. A produçäo da toxina no genótipo 2117 foi 2 a 14 vezes menor que no genótipo Tatu vermelho nos primeiros 14 dias após a inoculaçäo, tornando-se praticamente equivalente no 21§ dia.

Incidência de aflatoxinas em milho (Zea Mays L.) com diferentes níveis de umidade, após tratamento com fungicida, armazenado em atmosfera com e sem aeraçäo / Incidence of aflatoxins in corn (Zea mays L.) with different levels of moisture, after treatment with fungicide, at atmosphere with and without ventilation

Foi verificada a producao de aflatoxinas em amostras de milho, cultivar BR201, plantada em 1994, no Centro Nacional de Milho e Sorgo(EMBRAPA), em Sete Lagoas, Minas Gerais. As amostras, coletadas em duplicata, apresentando diferentes níveis de umidade, foram tratadas com soluçäo aquosa e oleosa de Iprodiona (20ppm), seguido de um armazenamento em tambores metálicos, com e sem aeraçäo, proporcionando uma temperatura de 18-20 graus centígrados e 35-40 graus centígrados, respectivamente. Os resultados encontrados mostraram um reduçäo dos níveis de aflatoxinas nas amostras tratadas com Iprodiona e armazenadas em atmosfera aerada. Quando o acondicionamento foi realizado em atmosfera sem aeraçäo (temperatura 35-40 graus centígrados), o decréscimo dos teores de aflatoxinas näo foi significativo, principalmente nos níveis de umidade mais elevados, indicando que temperatura e umidade säo fatores importantes na biossíntese de aflatoxinas